引言

近年来，随着精准医学的发展，遗传性肿瘤的风险评估和管理逐渐成为临床研究的重要领域。乳腺癌易感基因（BRCA1/BRCA2）作为与遗传性乳腺癌及卵巢癌综合征密切相关的两个关键基因，在遗传性肿瘤风险评估中占据核心地位。然而，传统的Sanger测序方法在检测效率和成本上存在局限性，无法满足大规模人群筛查的需求。因此，基于下一代测序（Next-Generation Sequencing, NGS）技术的BRCA基因检测应运而生。

为了规范NGS技术在BRCA基因检测中的应用，提高检测结果的准确性和可靠性，中国相关领域的专家经过深入讨论，共同制定了《基于下一代测序技术的BRCA基因检测流程中国专家共识》。本共识旨在为临床医生提供科学、实用的操作指南，以确保BRCA基因检测的质量控制和技术标准化。

检测流程概述

1. 样本采集与处理

- 样本类型：外周血或唾液样本是目前常用的检测材料。

- 样本质量控制：确保样本无污染且DNA浓度符合要求，避免因样本质量问题影响后续分析。

2. 文库构建

- 使用特异性引物扩增BRCA1和BRCA2基因的所有编码区及部分非编码区。

- 应用多重PCR或液相杂交捕获技术富集目标区域。

3. 测序平台选择

- 推荐使用高通量测序平台，如Illumina MiSeq、Ion Torrent等，这些平台具有较高的准确性、灵敏度和数据产出能力。

- 确保测序深度达到设定标准，通常建议覆盖深度≥50x。

4. 数据分析

- 数据预处理：去除低质量读段并进行比对。

- 变异检测：采用生物信息学工具识别单核苷酸变异（SNVs）、插入缺失变异（InDels）及其他结构变异。

- 功能注释与分类：根据ACMG指南对变异进行致病性评估，分为致病性、可能致病性、意义未明、可能良性及良性五个等级。

5. 报告撰写与解读

- 报告内容包括患者基本信息、检测方法、变异描述、临床意义以及随访建议。

- 强调遗传咨询的重要性，帮助患者理解检测结果及其潜在影响。

质量控制措施

- 实验室内部质控：定期开展阳性对照品测试，并记录每次运行的质控指标。

- 外部质评参与：积极参加国内外权威机构组织的能力验证项目，持续提升技术水平。

- 人员培训与考核：确保所有操作人员均接受专业培训并通过考核后上岗。

结论

本共识基于当前最新的科研成果和技术进展，为NGS技术应用于BRCA基因检测提供了全面指导。通过严格执行上述流程，可以有效提高检测的精确度与一致性，为遗传性乳腺癌及卵巢癌患者的早期诊断和预防提供强有力的支持。未来，随着技术的进步，我们期待NGS技术能够在更多遗传性疾病领域发挥更大作用，推动精准医疗的发展。