在植物组织培养技术中,MS(Murashige和Skoog)培养基是一种广泛应用的基础培养基。它以其科学的设计和广泛的应用性,在植物细胞、组织和器官培养中发挥着重要作用。而为了简化配制过程并提高工作效率,通常会先制备MS培养基的母液,然后根据实际需求进行稀释使用。以下是MS培养基母液的具体配方及配制方法。
MS培养基母液成分及其配比
MS培养基的核心在于其精确的营养成分配比,包括大量元素、微量元素、铁源以及有机附加物等。以下是各成分的具体配比:
1. 大量元素母液(1升)
- NH₄NO₃(硝酸铵):16.5克
- KNO₃(硝酸钾):19.0克
- CaCl₂·2H₂O(氯化钙二水合物):4.4克
- MgSO₄·7H₂O(硫酸镁七水合物):3.7克
- KH₂PO₄(磷酸二氢钾):1.7克
以上成分按照上述比例溶解于蒸馏水中,并定容至1升,此为1×大量元素母液。使用时需按一定倍数稀释。
2. 微量元素母液(1升)
- MnSO₄·4H₂O(硫酸锰四水合物):2.28克
- ZnSO₄·7H₂O(硫酸锌七水合物):0.86克
- H₃BO₃(硼酸):0.62克
- Na₂MoO₄·2H₂O(钼酸钠二水合物):0.25克
- CuSO₄·5H₂O(硫酸铜五水合物):0.025克
- CoCl₂·6H₂O(氯化钴六水合物):0.025克
同样将这些成分溶解于蒸馏水中并定容至1升,得到1×微量元素母液,使用时按需稀释。
3. 铁源母液(1升)
- FeSO₄·7H₂O(硫酸亚铁七水合物):3.0克
- Na₂EDTA(乙二胺四乙酸二钠盐):3.7克
将这两种物质混合后加入少量碱性溶液调节pH值至微碱性,再补充蒸馏水定容至1升,形成稳定的铁源母液。
4. 有机附加物母液(1升)
- Thiamine HCl(硫胺素盐酸盐):0.1克
- Nicotinic acid(烟酸):0.5毫克
- Pyridoxine HCl(吡哆醇盐酸盐):0.5毫克
- Glycine(甘氨酸):2.0毫克
将这些成分溶解于蒸馏水中并定容至1升,制成有机附加物母液。
母液的使用注意事项
1. 精确称量:所有化学试剂必须严格按照配方准确称量,避免因误差影响培养效果。
2. 分装保存:配制好的母液应分装成小瓶或容器内,密封冷藏以延长保存时间。
3. 现配现用:虽然母液可以短期储存,但建议尽量现配现用,确保实验结果的准确性。
4. 操作规范:整个配制过程中要保持无菌环境,防止污染。
通过以上步骤制备出的MS培养基母液,能够满足大多数植物组织培养的需求。正确掌握母液的配制技巧不仅提高了工作效率,还保证了实验数据的一致性和可靠性。希望本文提供的信息对从事相关工作的研究人员有所帮助!